线粒体是存在于所有真核细胞中的独特的膜结合细胞器，作为ATP生产和细胞能量供应的主要场所，线粒体的独特方面（包括称为mDNA的单独遗传物质，其自身的蛋白质合成机制以及严格调节的膜电位梯度）使其成为重要的研究课题，另外，随着衰老过程和更多其他人类疾病方面的研究发现，线粒体的作用比以往更加值得我们研究。
这期主要给大家带来线粒体荧光探针（活细胞和固定细胞），线粒体膜电位探针，ATP检测，线粒体自噬检测，线粒体通透性转换孔（MPTP）检测相关工具。
一．细胞线粒体染料
1.用于标记活细胞线粒体的可用MitoLite染料
线粒体蓝色荧光染料MitoLiteBlueFX，货号：AAT-
2.CytoFix红色固定线粒体染色
CytoFixRed线粒体染色剂增强的细胞维持能力可使线粒体局部荧光得到保持，即使固定过程中线粒体膜电位丧失后也可以保留。该染料产生的荧光信号在溶酶体中得到很好的保留，使其便于长期跟踪线粒体。CytoFix红色线粒体染色剂可与GFP表达的细胞，其他荧光偶联物和其他细胞器染色剂一起使用，进行多色分析。它既可用于悬浮细胞，也可用于贴壁细胞，并易于适应各种荧光平台。
CytoFix红色线粒体染色的特征：
线粒体染色效率高
固定后可长期保留
操作时间短，标记步骤简便
在96孔黑边框透明底板上用CytoFixMitoRed染色的HeLa细胞的荧光图像。
CytoFixRed—适用于固定细胞线粒体染色
CytoFix红色线粒体染色，货号：AAT-
二．线粒体膜电位：
电子传输链产生的线粒体膜电位（ΔΨm）是健康的线粒体功能所必需的关键参数。与质子梯度一起，它产生了线粒体ATP合成背后的驱动力。它通过选择性消除功能异常的线粒体在线粒体稳态中发挥关键作用，并且是线粒体钙稳态的重要组成部分。
凋亡早期的显着特征是正常线粒体功能的破坏，线粒体膜的破坏和氧化还原电位可能会引起细胞活力的不必要损失，并成为导致各种疾病的原因。我们提供各种各样的荧光探针，用于分析活细胞中正常线粒体活性的各个方面，包括活性氧（ROS）产生，线粒体膜电位和钙通量。
1.JC-10双发射膜电位（ΔΨm)探针
JC-10是JC-1的衍生物，是电位依赖性探针，用于通过流式细胞仪，荧光显微镜和基于微孔板的荧光测定法确定ΔΨm。在健康细胞中，JC-10选择性地聚集在线粒体中，生成橙色的JC聚集体，该聚集体在nm处显示出较宽的激发光谱和zui大发射。然而，在具有低ΔΨm的凋亡和坏死细胞中，JC-10从线粒体中扩散出来，并生成JC-10单体，导致向绿色发射（nm）处转移。JC-10允许以定性和定量方式来可视化ΔΨm的变化，分别考虑从橙色到绿色的荧光发射和荧光强度比的变化。它已成功用作多种样本类型的ΔΨm指示剂，包括肌细胞，神经元等。
JC-10的特点：
易于使用：稀释到水性缓冲液中时，JC-10不会沉淀，从而消除了伪影。
坚固：JC-10由于在水性介质中的溶解度提高和灵敏度更高，因此测定偏差较小。
增强的信号：JC-10具有比JC-1高的信噪比。
增强的灵敏度：在所有测试的细胞系中，JC-10能够比JC-1更好地检测到ΔΨm损失的细微变化。
广泛的应用：JC-10可用于原代大鼠肝细胞检测
方便：JC-10与荧光酶标仪，细胞成像仪和流式细胞仪兼容。
用JC-10（货号）和JC-1（货号）在Jurkat细胞中测定了喜树碱诱导的线粒体膜电位变化。将Jurkat细胞用喜树碱（10M）处理4小时后，将JC-1和JC-10染料加载溶液添加到孔中，并孵育30分钟。使用NOVOstar酶标仪（BMGLabtech）在Ex/Em=/nm和/nm下测量了JC-1和JC-10的J聚集体和单体形式的荧光强度。
JC-10和JC-1双发射线粒体膜电位探针
线粒体膜电位荧光探针JC-10，卓越的JC-1替代物，货号：AAT-
2.线粒体选择性罗丹明酯
细胞渗透性阳离子罗丹明，例如TMRE和TMRM，很容易被活性线粒体隔离，通常用于标记活细胞中的线粒体。像JC-10一样，线粒体中TMRE和TMRM的吸收是由线粒体膜电位驱动的。两种染料都已成功用于动态和原位定量检测，用于筛选线粒体通透性转换孔的抑制剂，评估活细胞中线粒体的功能，并可用于区分活的和死的细胞群，这些电位染料表现出zui小的自发淬灭性，低细胞毒性和合理的光稳定性，它们的荧光强度可以用流式细胞仪或荧光显微镜进行测量。与TMRM相比，TMRE的疏水性略强。
用于测量线粒体膜电位的电位染料
线粒体选择性罗丹明酯，货号：AAT-
三．ATP测定：
三磷酸腺苷（ATP）是一种复杂的有机分子，参与细胞的能量生成，代谢调节和细胞信号传导。它作为主要能源存在于所有活生物体中，并在没有活生物体的情况下迅速降解。因此，ATP测定是一种有用的工具，可用于各种研究应用程序中，以鉴定活生物体的存在。常见的应用包括细胞活力和细胞毒性，表面细菌的检测，水中细菌的定量，培养中的体细胞以及食品质量和污染测试。
我们的PhosphoWorks发光ATP分析提供了一种快速，简单且均一的生物发光方法，可用于通过ATP检测确定哺乳动物细胞的细胞活力，细胞毒性和增殖。
用于测量ATP活性，以及生成或消耗：
PhosphoWorksTM荧光ATP检测试剂盒，货号：AAT-
文章来源：每日生物评论
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