碘化丙啶(PI)(死细胞核染料,Propidiumiodide)是一种不渗透膜的红色荧光染料,碘化丙啶可染色DNA。碘化丙啶通常被排除在活细胞之外,并且可以穿透受损的细胞,因此通常用于鉴定细胞的活力。PI适用于荧光显微镜和流式细胞仪。碘化丙啶属于溴化乙啶相似化合物。
碘化丙啶(PI)(-16-4,Propidiumiodide)的毒理属性:
碘化丙啶(PI)(-16-4,Propidiumiodide)的应用:碘化丙啶是一种膜不可渗透的DNA嵌入剂。在nm处有红色荧光。可用于流式细胞仪染色凋亡细胞和细胞核。可用于区分凋亡和坏死细胞死亡,而仅染色坏死细胞。可与标记有异硫氰酸荧光素的常见绿色荧光探针一起使用。
碘化丙啶(PI)实验操作步骤:1.细胞按照实验方案进行凋亡诱导,g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次后,轻轻重悬细胞并计数。备注:碘化丙啶(PI)品仅在悬浮培养的细胞中验证,良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时,可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡,对实验结果可能存在不可控的影响,请谨慎处理。2.取1~5×重悬的细胞,g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入μL稀释的1×AnnexinVBindingBuffer工作液重悬细胞。3.细胞悬液中加入5μL的AnnexinV-荧光染色液和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。4.轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15~20min。5.反应完成后立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
碘化丙啶保存溶液配制: