不久之前，给大家讲解了AnnexinV实验中需要注意的一些小细节，具体文章从入门到精通：AnnexinV凋亡实验超详细攻略
但是好多小伙伴跟反馈说，这些细节问题我在实验的时候都注意了，但实验结果还是
不理想。
出现异常实验结果时，我们该怎么办呢？
直接丢掉这次数据重新实验吗？
No！No！No！
我们需要认真对待失败的实验数据，分析总结实验失败的可能原因，这样才能有针对性地重新实验，得到理想的实验结果。
本期流式课堂，将结合多年实验经验，为大家带来AnnexinV的常见问题分析，通过实际案例，让大家更深入地了解AnnexinV实验。
问题一
处理组晚期凋亡细胞分两群
缺少早期凋亡
可能原因
ProbableCause
细胞处理条件太过剧烈，如：药物浓度过大、溶解药物的有机溶剂用量过大、极端条件（沸水等）处理细胞，导致细胞迅速死亡，呈现类似周期实验中细胞被固定的效果，缺少凋亡过程。
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解决方案
Solution
温和处理细胞，如：降低药物浓度；有机溶剂（DMSO等）的量最好控制在5‰以下。
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问题二
缺少早期凋亡细胞
并且伴随大量坏死或裸核细胞
可能原因/ProbableCause
药物处理时间过长，不耐药细胞凋亡后转向裸核，耐药细胞不再发生凋亡。
解决方案/Solution
缩短药物处理时间（为保证凋亡效果，可以适当增加药物处理的剂量）。
问题三
核染（PI/7-AAD/DAPI）
无阳性信号
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问题四
分群不明显
问题五
空白组有荧光信号
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问题六
正常细胞出现大量凋亡
今天的分享就到这里了~
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