1.培养液：DMEM/F12，10%FBS，U/ml青链霉素2.材料ICR乳鼠，饭盒、眼科直剪、眼科直镊、眼科弯镊、玻璃培养皿、酒精棉球、15ml和50ml的离心管，磁力搅拌器和搅拌子(或者水浴振荡器)、目不锈钢筛网。3.方法3.1将胰酶和I型胶原酶用PBS液配成0.1%的浓度的混合溶液，并放置于4℃。3.2解剖取材：将2-3只小鼠放入75%酒精中浸泡约5分钟，然后取出小鼠固定在解剖板上，再用酒精棉球擦拭小鼠腹部，然后一层层剖开，露出内脏组织，用剪刀剪下胃组织，放入冰浴的PBS液中。重复以上过程。取材完毕后，撤掉取材的手术器械。3.3用第二套手术器械进行下列操作。用眼科直镊和眼科弯镊把胃周边的血凝块及纤维组织剔除掉，放在一个预先装好PBS液的培养皿中洗一遍后，将胃组织放在另外一个培养皿中，用眼科直剪将胃组织剖开，漏出内表面，然后洗掉里面的残留东西，再加入适量的酶液，转入15ml离心管中，放在37℃水浴中消化约10min，然后用玻璃滴管吹打消化液，镜检，可看见不少透亮的细胞团和一些单个细胞，加入少量完全培养基终止消化。3.4消化液终止消化后过目不锈钢筛网，收集滤液，rpm离心5min，沉淀用适量培养基重悬，用培养液调整细胞浓度为5x个/ml，接种到px2培养瓶中，放入培养箱培养。3.5上皮细胞刚接种时形状为圆形，大约在24h左右基本贴壁，此时细胞形态为鹅卵石样。
赞赏
