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深入研究人胃肠道上皮细胞培养系统,发展以

发布时间:2017-7-30 8:34:36   点击数:

翻译王蕾

校译程芮李鹏

首都医科医院

目的:人类肠道上皮细胞的培养技术正飞速发展,令人兴奋的是,该培养系统可能将成为个体化医学及研究的平台。然而,为了实现这个目标,必须改善及加强人上皮细胞的培养系统,从而使来自于患者的活检组织能在短时间内再生,形成细胞系,以便于实行多种功能的检测(如屏障功能及宿主-微生物的相互作用等)。

方法:在患者常规行上、下消化道内镜检查时获得的活检组织,成功建立了人消化道上皮细胞株(n=65),在含有高浓度生长因子(Wnt3a,R-脊椎蛋白和头蛋白)的条件培养基中,可增殖的干/祖细胞可以迅速生长。应用较低浓度生长因子混合Notch抑制剂的条件培养基可分化这些细胞,进行其他检测。

结果:从活检中获得的组织在2周内培养成上皮细胞系。肠道细胞含有多种干细胞标志物,可生长迅速,需要每3天按1∶3~1∶4比例进行传代。在分化的条件下,肠上皮细胞表现为在特定区域的生长成为成熟上皮细胞系。

在迁移膜上培养这些细胞,形成了具有功能性的单层细胞并被分泌的黏液覆盖。这些细胞应用二维培养基并加入不同菌株的致病性大肠埃希菌进行培养,表现出新的黏附性。

结论:这个培养系统将促进人肠上皮细胞个体及功能的研究,包括宿主-微生物的相互作用。

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