医工荟萃,不是萝卜开会,融合创新才是硬道理!
医工荟,除了工也得有医。今天开始,荟荟开始教大家做生物医学实验了。
刚进入实验室的童鞋们会发现,师兄师姐们做实验的时候经常会说:“我要去收细胞啦!”。然后就只见师兄师姐们从一个所谓“细胞房”里的一个叫做“培养箱”的柜子里拿出了圆的或方的盛着红色液体(培养基)的塑料盘子(培养皿)或瓶子(培养瓶)带回实验室,接着师兄师姐们就会对着盘子或瓶子又是吸又是刮,这时充满好奇心的你凑上去想看个究竟,结果却什么都看不到——Whatareyou弄啥咧?!其实他们在弄的就是细胞。
细胞的来源那么细胞是从哪儿弄来的呢?一般来说,有两种途径:
一种是细胞株,可以直接通过商业途径购买,比较权威的购买机构就是中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库,或者你跟拥有细胞株的人关系比较好的话,可以请他(她)kindly赠给你,到时候发文章在致谢的那段感谢一下他(她)的慷慨;
另一种是从实验动物的组织或外周血里提取,这种细胞我们一般管它叫做原代细胞。不严格来说,通常我们讲的细胞株和原代细胞特征性的区别是,细胞株可以连续传代,而原代细胞养着养着就挂了(本侠见过的原代细胞是这样,如有例外,请原谅本侠的狭隘)
细胞株之BV2(小胶质细胞)
原代细胞之腹腔巨噬细胞贴还是不贴?童鞋们在听师兄师姐们讨论的时候可能还会听到这样的问题:“你的细胞贴不贴壁啊?”,贴不贴壁就是培养的时候细胞会不会粘在容器底部,如果是贴壁的细胞,就算你把培养皿或培养瓶底朝上放,细胞也不会掉下来,这是层粘连蛋白、纤维链接蛋白等促细胞附着因子的作用结果。除了这种贴壁细胞,还有半贴壁细胞和悬浮细胞。以大家的智慧肯定能看得出来这两种细胞究竟有什么样的特性。举几个例子,例如巨噬细胞就是一种贴壁细胞(如上图),中性粒细胞是半贴壁细胞,而T、B细胞则属于悬浮细胞。
风一样的男子(中性粒细胞追逐细菌)
伺候细胞大爷如果你用的是细胞株,那就请做好心理准备了,虽然细胞的获取比较方便,但是细胞就像花花草草一样,需要时常打理,并且打理的时候需要灌注你的爱心,不然它会giveyousomecolourstoseesee的;
如果你用的是原代细胞,你可以暂时庆幸不需要花很多精力来养细胞,但是不要高兴的太早,因为取细胞的过程比较花时间,如果很不幸的是需要取例如中枢神经系统或是肠道这些部位的细胞,那你就只能耐着性子当是修行了,因为取的过程繁琐且得到的细胞量很少,另外,取原代细胞做实验还有一个让人提心吊胆的是,如果小鼠很珍贵的话……呵呵哒……所以,用细胞株和用原代细胞各有利弊,总的来说,能用细胞株的话还是比较便利一点,但是究竟是用哪种细胞,得看实验要求。
当我们确定了使用哪种细胞,接下来就涉及细胞培养的问题了。首先我们来说说在哪里养细胞。细胞株的常规培养、以及原代细胞的体外实验处理等操作都需要无菌操作环境。一般实验室都会配备细胞房并放置超净工作台,对细胞的无菌操作就在细胞房里的超净工作台中进行。细胞处理好后需要放在带有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。那细胞究竟该怎么来养呢,且看生物医学实验入门(2):无菌操作。
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