作者：刘玉瑰
来源：中国实用医刊
本文重点探讨了宫颈上皮细胞DNA定量分析技术在宫颈癌早期筛查中的应用效果，结论表明宫颈上皮细胞DNA定量分析方法需与杂交捕获HPV检查及液基细胞学检查联合应用，可提高宫颈癌诊断率。
宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤，据统计，我国宫颈癌发病率及新发人数均较高，每年新发病例约4.5万，占全球发病总数的1/4，严重影响女性身心健康。研究表明宫颈癌由癌前病变转变为宫颈癌需5～10年，这为临床医生干预与治疗宫颈癌提供了充裕的时间，因此，阻止宫颈癌的发生发展是现代妇科学的重要课题。定期进行宫颈癌筛查是目前最有效的控制途径，而如何选择合理、高效、经济、规范的筛查方法是目前急需解决的问题。本研究比较宫颈上皮细胞DNA定量分析、杂交捕获HPV、液基细胞学检查三种方法的优劣性。
资料与方法
一般资料选取年10月—年10月行妇科检查的妇女例，年龄23～67岁，平均46.18岁。入选标准：排除妊娠期、月经期与哺乳期；24h内无性生活，72h内未进行阴道操作，1年内未进行宫颈癌筛查。排除标准：患有肉眼可疑生殖系统肿瘤者；有阴道不规则流血情况者；患有阴道炎症者；患有高血压、糖尿病等内外科合并疾病者；生殖器官发育不良者；带有宫内节育器，使用口服避孕药者，宫颈做过治疗或子宫切除术后患者。
宫颈上皮细胞DNA定量分析DI表示细胞核DNA含量，正常DI值为1～2，即2C～4C细胞，以Auer的标准为依据。当出现DI＞2.5、DI在1.5～2.5之间的3C与4C细胞、非整倍体细胞峰的情况均为不正常。
杂交捕获HPV检测标本离心后，将沉淀物用PCr方法检测标本中的hr-HPVDNA，DNA＞1.0ng/L为阳性，检测范围为目前已知的13种hr-HPVDNA（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）。
液基细胞学检查经巴氏染色制片，以年的TBS报告系统为标准，分为5个级别，即：正常或良性；不明意义的非典型鳞状上皮；低级别鳞状上皮内病变；高级别鳞状上皮内病变或原位癌；鳞状上皮浸润癌。
统计学方法采用SPSS15.00统计软件分析数据，计数资料百分率应用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
结果
宫颈上皮细胞DNA定量分析方法的准确度、敏感度、特异度分别为73.80%、61.28%、67.53%，杂交捕获HPV检查分别为90.20%、86.32%、92.20%，液基细胞学检查分别为60.56%、77.94%、62.32%。杂交捕获HPV检查的准确度、灵敏度及特异度均高于宫颈上皮细胞DNA定量分析，差异有统计学意义（P＜0.05）。
讨论
宫颈癌是妇科常见疾病之一，好发于30～35岁妇女，其发病主要原因是病毒感染，即生物学因素，该病具有病发率高及病死率高的特征，严重威胁女性健康。因此，需加强与重视宫颈癌早期筛查。
正常细胞与肿瘤细胞在生长时，其细胞核内的DNA数量变化是有差异的，通过对这种DNA数量变化的分析能鉴别正常生长周期细胞与恶性肿瘤繁殖细胞。人体大多数细胞均处于静止期，宫颈表层细胞也属于此期，其对应的DI（DNA指数）为1；处于分裂期的细胞，其细胞核内的DNA合成与染色体分裂会发生变化，对应的DI为1～2。细胞恶变过程中，DNA含量的变化较形态学改变早，能更早的检出癌前病变，恶性肿瘤细胞的DNA数量显著增加，测量其含量能作为癌细胞的客观依据。
宫颈癌筛查常用的方法之一是传统宫颈涂片，但此方法易出现假阴性，且诊断准确率不高。宫颈上皮细胞DNA定量分析方法是在传统宫颈涂片基础上进行了改进，采用细胞图像分析系统、光密度对比分析和人工智能技术，实现了细胞核内DAN的定量分析。其基本原理是：首先对标本细胞进行特异性的染色，细胞核DNA数量与染色深浅正相关；再经光学显微镜下分析，采用积分光密度值反映细胞核的DNA数量（M）；通过内参照确定正常细胞的积分光密度值（S）；细胞的DI＝M/S，正常细胞DI＝1，异常细胞DI＞2.5。宫颈上皮细胞DNA定量分析方法与传统宫颈涂片相比，其准确度、灵敏度及特异度均得到了提升，但细胞核内DNA数量易受物理、化学及病理等影响，如放射线、病毒感染及缺乏VitB12等均能导致细胞核内DNA数量变化，因此，宫颈上皮细胞DNA定量分析方法还不能准确诊断宫颈癌。液基细胞学检查是在传统巴氏涂片方法基础上发展出来的，将标本去除后迅速浸入细胞保存液中，避免细胞丢失或细胞过度干燥，再将保存液中的细胞进行程序化处理，使得涂片薄层均匀一致，更好的在镜下观察，提高异常细胞检出率，降低假阴性，提升准确度、灵敏度及特异度。本研究结果显示，液基细胞学检查敏感度高于宫颈上皮细胞DNA定量分析，但准确度及特异度低于宫颈上皮细胞DNA定量分析，可将两者联合应用。研究表明，宫颈癌发病的重要原因之一是HPV病毒感染，杂交捕获HPV检查检测的是HPV基因分型，因HPV感染阳性率与宫颈上皮病变程度正相关，因此杂交捕获HPV检查能预测宫颈癌发展。本研究结果显示，杂交捕获HPV检查的准确度、灵敏度及特异度均高于宫颈上皮细胞DNA定量分析，差异有统计学意义（P＜0.05），说明杂交捕获HPV检查在诊断宫颈癌方面有一定优势，可用于判断治疗后效果及预测患者的预后，但其价格较昂贵，不适合普查应用。
综上所述，宫颈上皮细胞DNA定量分析、杂交捕获HPV、液基细胞学检查三种方法各有优劣。相对于杂交捕获HPV检查及液基细胞学检查两种方法，宫颈上皮细胞DNA定量分析方法的准确度、灵敏度及特异度均不高，为提高宫颈癌诊断率，尽早发现与治疗宫颈癌，提升疗效，宫颈上皮细胞DNA定量分析方法需与杂交捕获HPV检查及液基细胞学检查联合应用。
更多女性宫颈健康内容敬请北京治疗白癜风最大的医院北京最好白癜风专科
