细胞名称:猪原代肾上皮细胞
细胞来源:源于刚出生的藏族小型猪肾脏组织
组织特点:样本组织块基本呈棕色,质软,易剪碎,血细胞多
分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)
培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)
组织分离步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼SoulutionA收集样本,4℃保存运输→无菌生物安全柜→无水乙醇洗一次(≤3s)→SolutionB洗两次→转移至无菌培养皿中→去除包膜,眼科剪剪碎至1-2mm3→加入10mLSolutionC,37℃,3.5h→离心,rpm,8min→去上清,5mLSolutionD重悬,37℃,10min→加入10mLSolutionE重悬,70μm细胞筛过滤→收集滤液离心,rpm,10min→去上清,加入5mLSolutionB,重悬→离心,rpm,5min→去上清,猪原代肾上皮细胞基础培养基重悬,铺至T25培养瓶进行培养。(详尽步骤请参考原代细胞分离培养试剂盒说明书(IMT-K3),原代细胞持续培养方法详见猪原代肾上皮细胞培养试剂盒说明书(IMT-K1-)或猪原代肾上皮细胞培养基(IMT-CM-)。▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲组织分离要点
该组织质感较软,易剪碎,而剪碎程度直接影响消化酶的消化时间及获取细胞量的大小,故尽可能剪碎至糊状;该组织消化时间为2.5h。
细胞形态:上皮细胞样,细胞多呈扁平多边形,镶嵌排列呈铺路状,细胞结合紧密。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:该细胞增殖速度稳定,细胞传代消化时间为2-3min,传代密度为5X个,培养4-5d后细胞融合度可达80%或以上。细胞图片
细胞潜在用途
1.西藏小型猪肾上皮细胞可用于多种猪病毒增殖,包括猪细小病毒、水泡性口炎病毒、非洲猪瘟病毒、口蹄疫病毒等,对于多种病毒的研究及相关疫苗的研制具有重要的意义。
2.西藏小型猪肾上皮细胞的细胞学研究为西藏小型猪在人类肾脏疾病动物模型制作以及某些药物肾脏毒性的临床前安全性评价提供了客观的科学依据。
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