流式细胞分选技术具有检测速度快、统计学精度高、可在分析的同时把具有指定特征的细胞分选出来等特点,因而应用范围广泛,包括肿瘤干细胞分选、外周血细胞分选、染色体分离、稳定细胞转染株筛选等方法,比如肿瘤干细胞是肿瘤中具有自我更新、无限增殖及多向分化潜能的细胞,这部分细胞虽然只占少部分,但在肿瘤的发生、演进、复发、耐药及逃逸免疫系统的识别和清除过程中可能发挥了至关重要的作用。因此,建立有效的肿瘤干细胞分离方法,将有助于人们深入了解肿瘤的发病机理,从而建立新的有效的治疗方法。
流式分选技术进行干细胞分选
文章:
Long-TermCultureofGenome-StableBipotentStemCellsfromAdultHumanLiver
MeritxellHuchetc.Cell,–,January15,
图注:对肝脏标本消化成单个细胞后,利用EpCAM(CD)和PI染色,EpCAM-PI-为活的肝细胞,EpCAM+PI-为导管上皮细胞,利用Moflo分选仪进行单个细胞分选后培养,只有EpCAM+PI-能继续生长。
图注:此图为分选后的EpCAM+PI-单个细胞,随着时间的推移,形成克隆生长。该细胞稳定,在回输体内后便能形成有功能的肝细胞(肝细胞无法在体外培养环境下扩增和具有功能)。运用流式分选然后培养出肝细胞,这使我们能在诸多肝脏相关疾病模型(比如急性肝损伤)中更直接的研究其毒理作用,以及进行药物实验。
本实验在BeckmanCoulter公司的MofloXDP上完成。