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举例解说哺乳动物细胞和昆虫细胞形态鉴

发布时间:2018-9-5 0:47:35   点击数:
导读

细胞变质的迹象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。这些变质迹象可能为多种原因所致,例如:培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质,或者这些迹象仅表明培养物需要更换培养基。变质严重时将会成为不可逆的变化。

定期检查培养细胞的形态(即:形状和外观)对于细胞培养实验取得成功至关重要。除确认细胞健康状态外,每次操作细胞时通过肉眼和显微镜检查细胞还可早期发现污染迹象,避免污染扩散至实验室其他细胞。

下文主要介绍哺乳动物细胞和昆虫细胞的形态差异。

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哺乳动物细胞

哺乳动物细胞形态差异

根据细胞形态,可将大多数培养的哺乳动物细胞划分为三大类。

◆成纤维(或成纤维细胞样)细胞为双极或多极细胞,呈细长形。它们贴附在基质上生长。

◆上皮样细胞呈多角形,尺寸更为规则,贴附在基质上呈散在斑片状生长。

◆淋巴母细胞样细胞呈球形,通常悬浮生长,不贴附在基质表面。

除上述基本类型外,一些细胞还可显示与其在供体中特殊功能相适应的形态特征。

◆神经元有多种形状和大小,但是可以粗略地划分为两个基本形态类别。I型具有很长的轴突,可长距离传递信号,II型则没有轴突。典型的神经元会从胞体部发出具有许多分支的细胞伸展结构,因此被称为树突树。神经元可以是单极或假单极细胞,即:树突和轴突发自同一突起,可以是双极细胞,即:轴突和单个树突发自胞体(有核细胞的中心部分)上相对的两端,也可以是多极细胞,即:细胞具有两个以上的树突。

细胞的形态

细胞系是一种利用原代人胚肾细胞经剪切后人腺病毒5型DNA转化建立的永久细胞系。该细胞系表达的腺病毒基因使该细胞可高水平地合成重组蛋白。

下列相差图像显示了贴壁培养条件下达到80%汇合(图3.1)以及悬浮培养条件下(图3.2)的健康细胞形态。

2

昆虫细胞

Sf21细胞的形态

Sf21细胞(IPLB-Sf21-AE)是从草地贪夜蛾(秋粘虫)分离的到的卵巢细胞。该细胞为球形,大小不等,略呈颗粒状外观。Sf21细胞可解冻后直接悬浮培养,用于细胞库的快速扩增、杆状病毒库的扩增和重组蛋白的生产。由于Sf21细胞与支持物表面贴附牢固,因此可通过单层培养用于转染或菌斑试验。

下图显示了悬浮培养(图3.3)以及贴壁培养达到汇合状态时(图3.4)的健康Sf21细胞昆虫细胞形态。

Sf9细胞的形态

Sf9昆虫细胞系是来自草地贪夜蛾IPLB-Sf21-AE亲本细胞系的克隆分离株,它是利用杆状病毒表达系统进行重组蛋白表达的合适宿主。虽然以往人们利用由培养角瓶和含血清基础培养基组成的静止培养系统进行昆虫细胞的培养,但是一般而言昆虫细胞并无贴壁依赖性,便于进行悬浮培养。

下图显示了悬浮培养和贴壁培养的健康Sf9昆虫细胞形态。Sf9细胞与支持物表面贴附牢固,而且体积小、形状规则,因而非常适合形成细胞单层和空斑。

细胞之邦







































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