近日,四川新生命干细胞科技股份有限公司(以下简称公司)干细胞与再生医学研究中心科研人员在《生物科学、生物技术及生物化学》(Bioscience,Biotechnology,andBiochemistry)期刊上发表研究性论文,宣布找到一种简单快速鉴别大鼠细胞株性别的基于qPCR的新方法。
在实验动物研究领域,幼龄大鼠和大鼠源细胞株的性别区分的准确程度对于科学研究具有十分重要的意义。
在此研究中,研究人员选择X染色体连锁的单拷贝基因AR(也叫雄激素受体,基因ID:)和Y染色体连锁的单拷贝基因Sry(基因ID:)作为检测对象,分别对雄性大鼠和雌性大鼠提取的DNA模板进行针对AR和Sry的qPCR分析,然后从得到的AR/Sry数值中发现规律,建立了基于AR/Sry的性别判定法;并用性别已知的大鼠源组织和多种大鼠源细胞株为样本,使用PCR法和针对Sry基因的原位杂交法验证了新方法的准确性。
该研究还表明,新方法相对于传统的只检测样本中Sry的巢式PCR和普通qPCR而言,能在较大程度上减少由于不同性别样本交叉污染和样本基因组DNA提取质量不佳,造成的性别误判的几率。同时,新方法初步给出了判断细胞株是否污染了其它性别的同类细胞的判定法,使研究者可以从AR/Sry的数值判断细胞株的纯净度。
论文通讯作者,公司干细胞与再生医学研究中心万谦博士表示,新方法相对于传统的PCR性别鉴定方法的优势主要在于:传统的PCR法是仅针对Sry基因的单基因检测法,而新方法同时检测了两个基因(AR和Sry),从而大幅增加了性别鉴定的可靠性。
据悉,《生物科学、生物技术及生物化学》(Bioscience,Biotechnology,andBiochemistry)创刊于年,属SCI收录期刊,在生物学同类期刊中颇具影响力。
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来源:四川新生命干细胞
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