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CART载体的输出三种不同系列的慢病

发布时间:2017-8-27 10:27:10   点击数:

一、基本的信息1、CAR-T的定义:嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)是将识别肿瘤相关抗原(TAA)的单链抗体(scFv)和T细胞的活化序列(CD3-ζ链或FcεRIγ)体外进行基因重组,形成重组质粒,然后在体外通过转染技术、转染经过纯化与大规模扩增后的T细胞,称之为CAR-T细胞。即将抗体对抗肿瘤抗原的高度亲和性和T淋巴细胞的杀伤机制相结合,通过基因转导方法转染T淋巴细胞,使其能特异性的识别和杀伤肿瘤细胞。2、CAR-T的应用前景T细胞作为免疫系统中最主要的效应细胞,是过继免疫治疗(AIT)重要的工具细胞,但本身存在一定的缺陷,如细胞来源困难、扩增倍数较低、细胞毒力不够、靶向性受MHC的限制、基因转染效率不高、转然后不能在体内持续扩增并保持抗肿瘤活性等,影响了其治疗效果。嵌合抗原受体(CAR)基因修饰T细胞是近年来发展的靶向免疫治疗新策略,它包括识别肿瘤相关抗原的单链抗体(scFv),共刺激因子和T细胞的活化基序,它能克服T细胞的上述缺陷,赋予T细胞更强的增殖性、持久的生命力,使T细胞能克服肿瘤局部免疫抑制微环境、打破宿主免疫耐受状态,以MHC非限制性方式识别并靶向性杀伤肿瘤细胞。CAR基因修饰T淋巴细胞为AIT(alaninetransaminase)增加了新的活力,为肿瘤的生物治疗开辟了新的研究领域。CAR以单链抗体-共刺激分子-免疫受体酪氨酸活化基序的嵌合模式修饰T细胞显示出良好的抗肿瘤作用,Ⅰ/Ⅱ期临床试验在白血病、淋巴瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的治疗效果,且在美国已获得III期临床研究许可。相信随着研究的不段深入,基于CAR的免疫治疗新策略会给肿瘤患者带来新的希望。3、目前已有CAR-T载体的优势:1)省去载体构建的繁琐工作,将为您的科研节省1-2年的时间;2)所有的载体构建完毕后,均通过测序验证,没有任何的碱基发生突变;您无需担心费尽周折构建好的载体,可能由于转化,扩增等某一环节引起的碱基突变或是片段重组而导致最终表达受限或不成功;3)平行拥有三套载体系统,由于构建一种载体系统,最终表达可能不理想,并且三种不同的载体系统,由于启动子不同,可为您提供多种选择;4)每种载体系统均包括三种不同的质粒:原始的带有GFP的表达载体;含目的基因的lenti-viral-1stCAR表达载体及相对应的lenti-vival-1stCAR-IRES-GFP阳性对照载体,方便您的实验平行做正负对照验证;5)您无须担心构建好的慢病毒表达载体是否适合已有的三种包装质粒,所有的慢病毒表达载体均已通过病毒包装测试,流式检测,病毒滴度均较高(可达)以上;6)病毒粒子均已进行感染测试,具有很强的感染能力;感染病毒后的T细胞已通过分子检测,并已进行体外毒性测定;7)所有的载体目前未经临床测试,只限科研使用;8)由于所有的表达载体均为1stCAR,如需同步使用2nd和3rdCAR基因作对比,只需一个月的时间即可提供相应的载体信息。

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