本期老久跟高三的同学们分享高考生物模拟试题。希望各位分享给周围的高三学生,期望对他们有所帮助。
第①步:用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出chlL基因片段。
第②步:将chlL基因与质粒构建形成重组质粒l。
第③步:将重组质粒l中chlL基因中部0.8kb片段删除,用一段红霉素抗性基因取代之,得到重组质粒2。
第④步:将重组质粒2导入蓝藻细胞,改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同,故能准确她与其发发生同源重组,产生磷缺失ch1基因的突变株。
请根据上述资料,回答下列问题:
(l)构建重组质粒1、2时,为获取相同的黏性末端,需使用________________酶对基因和质粒进行切割。此酶的作用是将DNA分子____________________键打开。
(2)质粒是基因工程中最常用的运载体,其化学本质是______________,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
(3)PCR扩增时必须加入引物,其实质是_________________,发挥的作用是_________________
________________________。
(4)利用PCR技术扩增DNA-般要经过三十多次循环,每次循环都要经过三个步骤,其中冷却至55-60℃发生的变化是__________________________。
(5)导入重组质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用_________________制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入____________________可将变异株细胞筛选出来。
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