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细说细胞十五大鼠原代膀胱上皮细胞

发布时间:2018-1-4 22:31:53   点击数:

细胞名称:大鼠原代膀胱上皮细胞

细胞来源:源于实验大鼠剪取的膀胱组织

组织特点:膀胱为一个储尿器官,由平滑肌组成的一个囊形结构,透亮光洁

分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)

培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)

分离传代培养▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼

(1)将F细胞重悬于1-2mL大鼠原代膀胱上皮细胞基础培养基中形成细胞悬液;(2)转移到T25中,将培养基体积补至4-5mL,使F细胞均匀铺在培养瓶中,置于培养箱(37℃,5%CO2)贴壁5小时以上或过夜,确保F细胞贴壁量达70%T25细胞培养瓶以上;(3)24h后观察,若有漂浮细胞,需更换新鲜大鼠原代膀胱上皮细胞基础培养基;(4)将新分离的大鼠原代膀胱上皮细胞重悬于1-2mL大鼠原代膀胱上皮细胞基础培养基中,转移至已接种F细胞的培养瓶,培养基体积补至7mL,置于培养箱(37℃,5%CO2)培养;(5)大鼠膀胱细胞生长丰度达70-80%可进行传代,先洗脱F细胞;(6)加入胰酶置于37℃孵育2-7min(视细胞贴壁能力而定)。当90%大鼠原代膀胱上皮细胞从培养瓶脱落后,加入1mL终止液(含10%血清的PBS缓冲液,使用前37℃水浴复温)终止。离心转移到T25中,将培养基体积补至4-5mL,加入适量F细胞均匀铺在培养瓶中,置于培养箱(37℃,5%CO2)贴壁5小时以上或过夜,确保F细胞贴壁量达70%T25细胞培养瓶以上;(7)24h后观察,若有漂浮细胞,需更换新鲜大鼠原代膀胱上皮细胞基础培养基。(详尽步骤及注意事项请参考IMT-K1-大鼠原代膀胱上皮细胞培养试剂盒)

▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲细胞形态:呈上皮细胞样,铺路石状。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:细胞前期活性好,消化约2-3min可完全消化,维持丰度70%传代,细胞生长太密容易衰老

细胞图片

大鼠原代膀胱上皮细胞

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