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细说细胞十小鼠原代气管上皮细胞

发布时间:2018-1-5 18:44:57   点击数:

细胞名称:小鼠原代气管上皮细胞

细胞来源:源于雌性C57小鼠正常气管组织

组织特点:样本组织块基本呈白色,较软,易剪碎,血细胞较少

分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)

培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)

组织分离步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼取材→无水乙醇洗一次(≤3s)→SolutionB洗两次→剪碎→加入10mLSolutionC,37℃,2.5h→离心,rpm,8min→去上清,5mLSolutionD重悬,37℃,10min→加入10mLSolutionE重悬过滤→离心,rpm,10min→去上清,加入5mLSolutionB,重悬→离心,rpm,5min→去上清,IMT-K1-培养基重悬,铺至T25培养瓶。(详尽步骤请参考IMMORTECH-IMT-K3原代细胞分离培养试剂盒说明书)。▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲

组织分离要点

小鼠气管组织块软,剪碎操作上难度较小,其剪碎程度直接影响最终获取细胞量的多少,故尽可能剪碎至糊状;小鼠气管组织消化时间约为1.67h,期间隔30min晃动1次避免组织块堆聚以保证组织与SolutionC接触充分,准确把握组织与SolutionC的接触时间,过长或者过短都会影响最终获取细胞量的多少。

细胞形态:细胞多呈扁平多边形,镶嵌排列呈铺路状,细胞结合紧密,细胞间质少,生长分裂旺盛。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:该细胞增殖快,速度稳定,细胞传代消化时间为2-3min,传代密度为3-4X个/cm2,培养3-4d后细胞融合度可达80%或以上。

细胞图片

P13d

Pd

细胞潜在用途

(1)细胞生物学上可以用于研究动物的正常或者病理细胞的形态生长发育,细胞营养代谢以及病变等微观察;

(2)遗传学上,对培养的气管上皮细胞进行染色体分型,进行遗传分析,为各种与遗传有关的现象的研究提供研究基础;

(3)小鼠气管原代气管上皮细胞与呼吸道主要病理生理疾病有关,模拟人气管组织建立模型,研究气管上皮细胞的正常功能、呼吸道疾病发病机理、组织器官功能重建或再造、测定药物对正常细胞的毒性以及吸入毒理学或环境毒理学研究中具有重要意义。

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长按







































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