细胞实验/转染
定义：细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。
分类：
按转染途径可分为：细胞转染分为物理介导、化学介导和生物介导三类。
按转染结果可分为：瞬时转染和稳定转染
应用：在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中。
总结：转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。
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不同转染途径的比较
1.物理介导：电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例。
2.化学介导：方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术。
3.生物介导：方法有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。
理论上，最理想的细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，目前看来，虽然转染效率最高、细胞毒性低，但整个过程比较复杂复杂，常常对细胞类型有很强的选择性。
因此，无论采用哪种转染技术，想要获得最优的转染结果，都需要对转染条件进行一定的优化。
影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑。
三种转染方法的优劣都给大家准备好了，有需要的同学可以截图保存。
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不同转染结果的比较
瞬时转染（transienttransfection）
外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24~72h小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统和荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。
稳定转染（Stabletransfected）
外源DNA既可以整合到宿主细胞中，也可能作为一种游离体（episome）存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小，大约1/转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记。如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。
血清在细胞培养过程中的重要性不言而喻：
提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调节它们所结合的物质活力。
有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。
是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
起酸碱度缓冲液作用。
提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。
参与细胞冻存。
