侧脑室内移植人羊膜上皮细胞可以改善转基因小鼠的空间记忆缺陷
人羊膜上皮细胞(humanamnioticepithelialcells,HAECs),具有胚胎干细胞和多能干细胞的特性,同时不具有法律和道德问题,因此成为细胞治疗的理想候选者。本研究的作者,中科院细胞生物研究所原所长郭礼和教授及其团队将人羊膜上皮细胞通过注射的方法移植到转基因阿尔茨海默症(AD)小鼠侧脑室,该小鼠模型还共表达了早老素-1(PS1)和瑞典突变型淀粉样前体蛋白APP-Swe)基因,评价移植的细胞对小鼠空间记忆的改善。
研究方法:通过PCR鉴定APP-swe和PS1基因,检测小鼠的基因型。作者选择了20只转基因小鼠(TG)和20只野生型小鼠(WT),随机分为两组,每组20只。移植组移植人羊膜上皮细胞,对照组用磷酸盐缓冲液做安慰剂。采用六臂水迷宫试验评价TG小鼠和WT小鼠的空间记忆能力。利用刚果红和酸-银-乌洛托品染色分别对淀粉样蛋白斑块和神经原纤维缠结进行分析。用免疫荧光细胞化学来追踪存活的人羊膜上皮细胞。用免疫组化来测定人羊膜上皮细胞上八聚体结合蛋白4(Oct-4)和Nanog的表达。高效液相色谱(HPLC)被用来测定大鼠海马中的乙酰胆碱。用乙酰胆碱酯酶染色法测定海马区基底前脑和神经纤维的胆碱能神经细胞的密度。
研究结果:8月龄双TG小鼠海马和额叶皮质出现淀粉样沉积,但WT大鼠没有。结果表明移植的人羊膜上皮细胞在小鼠体内至少可以存活8周,并且能迁移到第三脑室,而且没有发生免疫排斥。移植的人羊膜上皮细胞可以表达干细胞特异性标记,Oct-4和Nanog。与对照组相比,移植了人羊膜上皮细胞的TG小鼠不但空间记忆大大改善,而且乙酰胆碱浓度和海马胆碱能神经的数量也有增加。
结论:结果证明,侧脑室内移植人羊膜上皮细胞可以改善TG小鼠的空间记忆。这种改善的原因之一是在海马体中,存活的胆碱能神经元越多,乙酰胆碱的含量越高。(以下为原文)
赞赏