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细胞培养技术知多少

发布时间:2018-7-19 15:08:05   点击数:

众所周知细胞培养基的种类繁多,细胞培养方式也较多,如何正确地使用培养基及最大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长,对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。

今天我们就继续通过一些许多人惯有的疑问带大家剖析一下哺乳动物细胞培养的基础知识!实验室的小师弟小师妹们,快把你们的眼神望过来!(前辈们也可以复习一下哦)

Q1

不恰当地保存我的组织培养试剂会影响培养物的生长速率吗?

会。动物血清应储存于–5至–20°C。培养基储存于2至8°C;请在推荐的保质期内用完。请将完全培养基(加入添加剂)保存于2至8°C,推荐的存放期限为2至4周。此外,尽量减少血清和培养基暴露于光线下的时间。

Q2

生物安全级别(BiosafetyLevel,BSL)的1至4级之间有何区别?

美国在生物安全方面的规章和建议公布于《微生物学与生物医学实验室的生物安全》文档中,该文件由疾病控制中心(CDC)与国立卫生研究院(NIH)共同撰写,由美国卫生与人类服务部发布。该文件定义了逐步增加的4个污染等级,简称为1至4级生物安全级别,其中描述了操作某一特定试剂所对应的风险级别,及其相应的微生物学方法,安全设备与设施保障。

生物安全级别1(BSL-1):BSL-1是大多数研究型与临床型实验室常规使用的基础保护级别,适用于那些不会导致正常健康人体发生疾病的试剂。

生物安全级别2(BSL-2):BSL-2适用于摄入后或经皮肤或粘膜接触会导致不同程度人类疾病的中等风险性试剂。大多数细胞培养实验室需至少达到BSL-2级别,但实际要求需基于所用的细胞系和所执行的工作类型来决定。

生物安全级别3(BSL-3):BSL-3适合于已知的具有潜在空气传播性的本土或外来制剂,以及可能引起严重和潜在致命感染的试剂。

生物安全级别4(BSL-4):BSL-4适用于具有高个体风险的外来制剂——这些制剂会通过空气传播造成生命威胁性疾病,且无可用治疗方案。这些试剂仅限于在高度封闭的实验室内应用。

Q3

在培养哺乳动物细胞时,我应将CO2培养箱设置为何种缓冲条件?

大多数常规哺乳动物细胞系在pH7.4的条件下生长良好,不同的细胞株系之间差异极小。大多数研究人员通常使用含5–7%CO2的空气,一般而言,4–10%的CO2浓度即可满足绝大多数的细胞培养实验要求。







































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