细胞名称:兔原代宫颈上皮细胞
细胞来源:源于新西兰兔宫颈组织
组织特点:样本组织块基本呈呈肉粉色,质地软,易剪碎,基本不含血细胞
分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)
培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)
组织分离步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼取材至于SolutionA中→无水乙醇洗一次(≤3s)→SolutionB洗两次→剪碎→加入10mLSolutionC,37℃,2h→离心,rpm,8min→去上清,5mLSolutionD重悬,37℃,10min→加入10mLSolutionE重悬过滤→离心,rpm,8min→去上清,加入5mLSolutionB,重悬→离心,rpm,5min→去上清,兔原代宫颈上皮细胞基础培养基重悬,铺至T25培养瓶。(详尽步骤可参考IMMORTECH-IMT-K3原代细胞分离培养试剂盒说明书)。▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲组织分离要点
组织块软,剪碎操作上难度较小,其剪碎程度直接影响最终获取细胞量的多少,故尽可能剪碎至糊状;该宫颈组织消化时间较长,时间为3h30min,期间晃动数次避免堆聚以保证组织与SolutionC接触充分;SolutionD消化时可晃动离心管悬起组织碎片以保证消化效果;组织消化终止后出现一定程度的粘稠,注意减少转移损失,必要时更换细胞筛。
细胞形态:细胞多呈扁平多边形,细胞略小,形态不够规则。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:该细胞分离初期,细胞形态较好,立体感较强,培养后期,细胞形态不够清晰。另外还需要较大传代密度。该细胞传代消化时间为3min。细胞图片
兔原代宫颈上皮细胞P13d
兔原代宫颈上皮细胞Pd
细胞潜在用途(1)利用CR技术在体外建立起兔源的宫颈上皮细胞系,可用于宫颈疾病发病机制的生物学研究。
(2)可作为细胞模型,为相关药物研究和应用的提供参考。
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