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高剂量pSin慢病毒载体介导的转染对诱导

发布时间:2017-8-23 8:46:52   点击数:

黄乙涓   中山大学中山医学院基础医学系

  ?目的?研究慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的诱导性多能干细胞(iPS),细胞形态和传代的影响。方法?通过包装慢病毒pSin-GFP感染iPS,分为实验组(细胞与病毒滴度比例1:)和对照组(细胞与病毒滴度比例1:1)感染人iPS,经过嘌呤霉素药物筛选获得单克隆,重复3次实验观察细胞形态学变化记录细胞每代克隆数,采用方差分析及t检验进行统计学分析数据结果,用免疫荧光和werstern检测iPS标志蛋白表达。结果?pSin-GFP病毒感染iPS后挑取24个单克隆细胞株,传十代后实验组(4.67±0.33)明显少于对照组(16.00±0.58)的细胞克隆数(t=17.00,P??0.01),实验组细胞状态稳定并正常表达Oct-4、Sox2、SSEA-1、Nanog和Tra-1-60。结论?使用1?:?的高比例慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的iPS可传代次数减少,形态学并未发生变化,其正常表达的干细胞标志性蛋白。

  ?多能干细胞;?慢病毒属;?基因修饰









































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