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临床前研究移植人羊膜上皮细胞可以改善脊

发布时间:2018-1-6 14:37:09   点击数:

移植人羊膜上皮细胞可以改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能

细胞移植治疗包括脊髓损伤在内的中枢神经创伤已经有很多成功的报道,然而到目前为止,这些细胞种类都或多或少面临着诸如来源受限,免疫排斥,有致瘤性等问题。而早在年,中科院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物研究所原所长郭礼和教授联合医院神经外科主任惠国珍教授就率先发现取自于胎盘的人羊膜上皮细胞可以明显改善脊髓损伤大鼠的后肢功能,并将这一成果发表于《ChineseMedicalJournal》。

人羊膜上皮细胞,是由受精卵发育至第8天的囊胚内细胞团分化而来,因此保留胚胎干细胞特性,具有多能干性,有较强的分化能力及可塑性。研究发现羊膜上皮细胞可分化为外胚层来源的神经元、星形胶质细胞、神经胶质细胞;中胚层来源的骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、肌细胞以及内胚层来源的肝细胞、胰腺细胞。同时,其具有干细胞旁分泌功能,能够分泌多种神经营养因子、神经递质和生长因子,可促进神经细胞生长,对于神经损伤修复具有较好疗效。其端粒酶活性较弱,因此自身增殖能力非常有限,无致瘤性。并且不表达HLA,无同种异体移植免疫原性。同时该类细胞能分泌表达多种抗炎症因子和相关蛋白,具有治疗炎症、纤维化的潜能;其分泌的免疫抑制因子则对自身免疫性疾病具有较好的疗效。

由于人羊膜上皮细胞可以表达和分泌一些神经营养因子,比如:BDNF和NT-3,还能表达神经元和神经胶质细胞标记,所以郭教授团队认为人羊膜上皮细胞对脊髓损伤的修复有促进作用,所以他们将人羊膜上皮细胞移植到脊髓损伤大鼠体内,观察大鼠的后肢运动功能是否有改善。

作者将分离得到的人羊膜上皮细胞用Hoechst进行标记。大鼠分为假手术组、细胞移植组、PBS组。移植在损伤后立即进行,用1mm×2mm×3mm的明胶海绵沾取约含1×HEACs的PBS液(5微升)行原位移植,PBS组则用1mm×2mm×3mm的明胶海绵沾取5微升的PBS液行原位移植,假手术组不进行任何移植。作者通过BBB评分对大鼠的后肢运动功能的改善进行了评估;通过形态学检测分析了移植的细胞在大鼠体内的存活情况、损伤灶的修复情况以及移植灶处髓鞘纤维的生成情况。

结果发现:羊膜细胞移植到脊髓损伤灶后能够存活下来并与宿主整合,损伤灶被移植的细胞和增生的胶质细胞完全充填,没有囊肿和疤痕形成,髓鞘纤维的化学染色发现,移植界面中存在大量的有髓鞘纤维,而对照组稀少。

结论:将人羊膜上皮细胞移植到脊髓损伤处,细胞可以存活时间很长,不会引起免疫排斥。人羊膜上皮细胞促进了轴突的再生,改善了后肢运动功能,抑制了被切断的RN神经元的萎缩。(以下为原文)

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