细胞名称:大鼠结肠上皮细胞
细胞来源:源于SD大鼠结肠组织,该组织在离体后,保存在样本收集液中冷藏存放48h后处理
组织特点:组织较软
分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)
培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)
组织分离步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼无菌环境下取组织立即置于SolutionA中→无水乙醇洗一次(≤3s)→SolutionB洗两次→剪碎→加入10mLSolutionC,37℃,2h55min→离心,rpm,8min→去上清,5mLSolutionD重悬,37℃,10min→加入10mLSolutionE重悬过滤→离心,rpm,10min→去上清,加入5mLSolutionB,重悬→离心,rpm,5min→去上清,IMT-CBM-大鼠结肠上皮细胞基础培养基重悬,铺至T25培养瓶。(详尽步骤可参考IMMORTECH-IMT-K3原代细胞分离培养试剂盒说明书)▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲组织分离要点
大鼠结肠组织较软,但是较难消化,尽可能剪碎至糊状,大小均一,其消化时间长达2h55min,期间每隔半个小时晃动数次,避免堆聚以保证组织与SolutionC接触充分。
细胞形态:细胞多呈扁平多边形,镶嵌排列呈铺路状,细胞结合紧密,细胞间质少,生长分裂旺盛。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:该细胞整体培养周期较长,分离初期,克隆较少,生长缓慢,后期(3代以后)细胞增殖速度稳定。细胞传代消化时间为5-8min,传代比例为1:2,传代密度为5X个/mL,培养3-5d后细胞融合度可达80%或以上。细胞图片
大鼠结肠上皮细胞17dP1大鼠结肠上皮细胞50dP5细胞潜在用途
(1)大鼠结肠上皮细胞的成功分离培养,为结肠上皮形态及功能研究提供理想的细胞模型。
(2)大鼠结肠上皮细胞的成功分离培养,也为结肠相关疾病的研究提供了稳定可靠的正常上皮细胞模型。
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