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细胞养久了,可能需要做个鉴定

发布时间:2018-7-13 18:56:37   点击数:

在生命科学领域,没有人不清楚细胞研究对于整个生物学发展的重大意义,以及对于生物医药乃至大健康产业的巨大推动作用。实际上,不仅仅是细胞生物学家需要用到特定的细胞系,分子生物学、免疫学、发育学、生理病理学、病毒学、药物开发等学科,都在不断地进行细胞培养、细胞转染、细胞融合、细胞周期、细胞凋亡等各种研究。

每个细胞系都有自己独特的历史,就像最有名的海拉(Hela)细胞系是一个不朽的生命传奇故事,这位出生于美国弗吉尼亚州种植烟草农户家的黑人女性,从年去世到如今已经过了60多年,这期间,海拉细胞被提供给了世界各地的研究机构,用于癌症研究和制药等,已经成为医学研究中十分重要的工具。如下这一段年的数据会让你觉得这是一个非常神奇的事件:“迄今为止,海拉细胞已在单细胞状态下活了代,相当于人类的45万年!据推算,迄今为止培养出的海拉细胞已经超过了万吨,其体积相当于多幢纽约帝国大厦。”

在如今的商业化时代,细胞系也是一个商品化的东西:截止目前,被ATCC、JCRB、RIKEN、DSMZ官方数据库收录的商用细胞株约为种左右。这么多种细胞系,在全世界各个实验室培养,那些个瓶子、皿和板,放在一个像洗衣机一样大小的培养箱内,接通二氧化碳并维持恒定的浓度,温度也保持在适当的数值,细胞就会不断的生长:指数级的生长,一个变两个,非常之快。当然,每种细胞都需要不同的培养基,就是一种红色或靠近红色的液体,有的培养基看起来像葡萄酒,而有些看起来则像某种鸡尾酒,也有的就像苹果醋,但一般不会看到像可乐或者橙汁一样颜色的培养基。

如果一名具有艺术气质的科学家进入了细胞生物学领域,很可能就会有各种艺术的火花出来,那些个形状颇具工艺设计水准的瓶瓶罐罐、颜色和粘度各异的液体、以及按照特定的操作习惯设计出来的器具,在具有艺术细胞的人的眼中是极具美感的。因此,如果细胞本身是一种物质,养细胞是一种艺术,那么细胞生物学家也就是艺术家。以超高的实验设计、熟练的操作技巧、良好的操作规范、出类拔萃的数据分析能力来进行细胞研究,必然可以取得丰硕成果,就像一件绝美艺术品的诞生。

但是,艺术品在制作过程中,可能因为一些不合适的手法或失误导致瑕疵,虽然这些潜在的造成瑕疵的原因在制作过程中可能已经感觉到,但是一般都会继续完成剩下的所有操作直到成品出来。就像一名细胞操作的高手,隐隐感觉到其中有什么问题,但是依然会继续把实验做完。特别是好像不对劲、却又无法确定的东西,可能会困扰一名实验人员很久。其中一个最容易忽视的问题,就是细胞系本身的性质是否如预期的一样,那些躺在培养瓶里的细胞,还是不是你设想中的那个东西。有时候细胞发生改变或混有其他细胞,甚至可能最初细胞来源就因为标记错误等各种原因而导致信息不正确,那些忘记了初心的细胞,当然会导致实验结果的误判,甚至使整个研究变得毫无意义。

我说的是不是有点玄乎了?实际上也还好。我也是刚刚接触到一个独特的领域——细胞系的鉴定工作。在这个领域,有许多东西的确是值得注意的:NIH和ATCC较早的时候就出呼吁,建议研究者对细胞株进行鉴定,以明确所使用细胞的身份。多种主流杂志也纷纷要求作者在投稿时提交细胞株鉴定(CellLineAuthentication)报告,有些杂志甚至要求作者提供实验前、实验中和实验后等不同阶段的细胞株鉴定报告,这些个杂志包括Nature、BioMed、Bentham、AACR等知名的期刊和研究领域。国际上都存在这种问题,国内自然不敢托大,去年中科院细胞资源库发表的数据(SciRep.Aug29;7(1):)表明,国内有超过20%的细胞存在误鉴定问题,其中包括不同物种之间的细胞污染、同一物种的不同细胞污染等情况。看起来,验证自己正在培养的细胞的身份,似乎已经成为一种趋势,各大期刊越来越多的增加这方面的要求。当然,不管投稿的时候期看是否有这方面的要求,作为一名严格的科学家,要清楚明确地知道自己正在用的细胞系没有问题,也是最基本的。

以下情况,一般做一个细胞鉴定的工作比较好:

当建立或获得一个新的细胞系时,啥信息都没有,最好鉴定一下

在细胞冻存之前,或细胞已连续培养2个月时,谁知道这么久了会不会有什么问题呢

在开始系列实验或发表文章之前,万一出了问题,等实验做完了才发现可不好办啊

细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大时,还是确认一下比较好

当实验室使用超过一种细胞系时,所有细胞系最好先鉴定以排除交叉污染的可能,交叉污染是一个很具话题性的东西

至于细胞鉴定的方法,STR基因分型、同工酶检测等方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一,几个比较有名的杂志如NatureMethods、PlosBiology都发表了一些专业的方法和指南。

如果你非要问,哪些地方可以做细胞鉴定,那我我也不好这么明目张胆的把这么重要的信息公布出来,留言或者私聊都可以。

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