广州都市报

您现在的位置: 细胞 > 细胞种类 > 动物细胞培养为啥要用二氧化碳培养箱

动物细胞培养为啥要用二氧化碳培养箱

发布时间:2018-4-12 16:29:11   点击数:
精彩内容

这两天看到有老师在网上讨论关于二氧化碳培养箱的问题,那么,今天苗老师就针对这一话题略作介绍吧。不对的地方,还请多指教。

1动物细胞培养为啥要用二氧化碳培养箱?高中教学中,我们一般解释为维持培养基的pH,这当然是没啥问题的。但是,为啥要用二氧化碳来维持pH,如何维持呢?

动物细胞多数需要微碱性环境,pH约为7.2~7.4,以不超出6.8~7.6范围为宜。缓冲系统对于维持培养基的pH是至关重要的,动物培养基的pH是通过模拟血浆中天然存在的

CO2/NaHCO3(实际是CO32-/HCO3-)系统来控制的。配置动物培养基时,会将NaHCO3作为等渗溶液的一部分添加到培养基。一方面,由于NaHCO3不稳定,易分解产CO2,CO2从培养液中游离到空气中,会使培养液pH升高;另一方面,细胞呼吸产生的CO2以及代谢产生的酸性代谢产物,又使pH降低。在培养开始的一段时间,细胞较少,呼吸产生的CO2较少,前者作用大于后者,培养液中pH可能会明显上升,这就需要培养箱中补充一定量的CO2来维持pH;而后期随着细胞数目增多,细胞产生CO2增加,后者作用便大于前者,此时,培养基中pH可能会明显上升,尽管大多动物细胞耐酸能力比耐碱能力略强一些,但如果超过警戒值,则需要更换培养基进行传代。培养液中一般加入酚红作为pH指示剂,所以此培养基中颜色变化是:樱桃红色→粉红色→黄色。如果使用培养基之前,先通入CO2,或在CO2培养箱内进行开放式培养,则培养基颜色变化是:樱桃红色→黄色。如果培养基变黄,则需要及时更换培养基。

培养箱中CO2浓度应与培养液中NaHCO3浓度相平衡,如果培养箱中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量应为1.97g/L;如果CO2浓度维持在10%,则NaHCO3的加入量应为3.95g/L。

动物细胞对pH变化比较敏感,但植物细胞就没那么娇弱了,培养过程中pH的变化幅度只要别太大,对它并不会造成明显损伤。

2二氧化碳培养箱简介

二氧化碳培养箱是一种可以对温度、湿度和pH三项指标进行控制的培养箱,不同品牌的产品虽然不尽相同,但大致原理是一样的。

①CO2的调控:

二氧化碳培养箱气路由高浓度的CO2钢瓶、气泵、稳压阀、针型阀,电磁阀、流量计及储气瓶等组成。当输入一定压力的高浓度CO2气体,通过调节阀、针阀及电磁阀的流量、时间控制,保证一定量的CO2气体进入工作室,达到自动控制工作室内的CO2浓度值。该值同时通过显示电路显示,便于观察了解。在CO2箱工作过程中,由储气瓶对工作室内进行补气,以保持稳定的CO2浓度值。

二氧化碳培养箱常用热导(TC)传感器或红外(IR)传感器检测箱体内二氧化碳浓度的变化。当二氧化碳培养箱的门被打开时,CO2从箱体内漏出,此时传感器就会探测到CO2浓度的降低,并做出及时的反应,重新注入CO2使其恢复到原先预设的水平。

②温度的调控:

CO2培养箱的温度是通过电热丝加热的,主要有水套式加热和气套式加热两种加热系统。

③湿度的调控:

大多数的CO2培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气的,大型的二氧化碳培养箱是用蒸汽发生器或喷雾器来控制相对湿度水平的。一些培养箱在底部设置湿度蓄水池,这样可以增强蒸发作用,但是,这个系统也更复杂,由于复杂结构的增加一些难以预料的问题也会在使用过程中出现。

以上内容仅代表个人观点,水平有限,能力一般,每次考试,倒数第三,如有错误,欢迎指正。

赞赏

长按







































女性白癜风怎么治疗
为白癜风患者健康保驾护航


转载请注明:http://www.youlizhouyi.com/xbzl/2841.html

热点文章

  • 没有热点文章

推荐文章

  • 没有推荐文章
网站简介 | 发布优势 | 服务条款 | 隐私保护 | 广告合作 | 合作伙伴 | 版权申明 | 网站地图

当前时间: