研究问题:体外模型中囊胚期胚胎和子宫内膜上皮细胞之间的相互作用是如何调控早期的植入阶段?
总结回答:鼠囊胚附着于人子宫内膜上皮细胞促使滋养外胚层分化为滋养层,侵入子宫内膜上皮。
已知内容:使用鼠囊胚和人子宫内膜细胞系的体外模型已经在植入时胚胎附着于子宫内膜上皮的分子生物学特性中证实是非常宝贵的。在这种体外模型中,涉及胚胎侵袭子宫内膜上皮细胞的基因尚未研究。
研究设计,大小,持续时间:本研究使用已建立的体外植入模型来研究在囊胚附着于子宫内膜上皮细胞期间细胞和分子间的相互作用。
参与者/材料,设置,方法:在试管中发育到E1.5的鼠囊胚在无血清培养基中孵化并与融合人子宫内膜腺癌衍生的Ishikawa细胞共培养。设计了一种基于囊胚振荡的附着稳定性。监测囊胚48h来建立植入动力学和使用荧光显微镜显示附着和入侵界面的光学切片。QT-PCR检测囊胚基因表达。共报道了个鼠囊胚的数据,3-6个实验重复。T检验和方差分析在P<0.05,P<0.01和P<0.时有统计学意义。
主要结果和可能性作用:孵育到E4.5的鼠囊胚表现出对共培养超过24小时的融合Ishikawa细胞弱附着性,中间稳定的附着从28h(E5.5+4H)以激素非依赖的方式发生。附着胚胎在48h(E6.5)后固定,常表现出突出形态特征和携带滋养层巨细胞(TGCs)的抗体标记,这破坏了Ishikawa细胞层。在胚胎E5.5开始的共培养也是从E5.5+4h发生中间稳定的附着;然而,这些胚胎没有继续破坏Ishikawa细胞层,即使当共培养延伸到胚胎第E7.5(P0.01)。从胚胎E4.5培养的囊胚在E5.5转移到直接共培养之前,渗透transwell小室插入到Ishikawa细胞之上继续附着,但是到胚胎E6.5时没有破坏Ishikawa细胞层(P<0.01)。胚胎E5.5的基因表达分析表明:从胚胎E4.5开始和Ishikawa细胞直接共培养导致滋养外胚层转录因子CDX2和GATA3的下调(P<0.05)及TGC的转录因子Hand1的上调(P<0.05)。与非子宫内膜成纤维细胞共培养并没有改变这些基因的表达。
大规模数据:无。
局限性,注意的问题:本研究使用的体外模型将人癌性子宫内膜细胞与鼠胚胎结合起来,观察到细胞的相互作用可能不能完全概括体内的。从这种模型中收集到数据可以被看成是一种假说,现在需要的是研究开发更复杂的人体植入模型,这种模型将多原发性子宫内膜细胞类型与替代的、真正的人类胚胎相结合。
研究结果的更广泛含义:本研究表明囊胚附着于子宫内膜上皮细胞在植入所需的滋养层细胞分化中是关键的一步。了解母体对胚胎发育的这种调控可能会治疗不育的新疗法。
研究资金和竞争利益:本研究得到了妇女健康(RG)慈善机构和英国糖尿病协会(15/)的资金支持,以及来自解剖社团对SCB的奖学金支持。无利益冲突声明。
关键词:植入/子宫内膜/胚胎发育/滋养层/转录因子
引文:RuanePT,BerneauSC,KoeckR,WattsJ,KimberSJ,BrisonDR,WestwoodM,AplinJD.Appositiontoendometrialepithelialcellsactivatesmouseblastocystsforimplantation.MolHumReprod.Sep1;23(9):-.doi:10./molehr/gax.PubMedPMID:.
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