细胞名称:兔原代食管上皮细胞
细胞来源:源于新西兰兔
组织特点:样本为食管组织,呈白色,质软,易剪碎,没有血细胞
分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)
培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)
组织分离步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼取材至于SolutionA中→4℃保存运输→无菌生物安全柜→无水乙醇洗一次(≤3s)→SolutionB洗两次→转移至无菌培养皿中→眼科剪剪碎至1-2mm3→加入10mLSolutionC,37℃,2h→离心,rpm,8min→去上清,5mLSolutionD重悬,37℃,10min→加入10mLSolutionE重悬,70μm细胞筛过滤→收集滤液离心,rpm,10min→去上清,加入5mLSolutionB,重悬→离心,rpm,5min→去上清,兔食管上皮细胞基础培养基重悬,铺至T25培养瓶。(详尽步骤可参考IMMORTECH-IMT-K3原代细胞分离培养试剂盒说明书)。▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲组织分离要点
该组织质感较软,易剪碎,剪碎程度直接影响消化酶的消化时间及获取细胞量的大小,故尽可能剪碎至糊状;该组织消化时间为2h;消化期间需晃动2-3次以免组织堆积并使组织与消化液充分接触。
细胞形态:上皮细胞样,细胞多呈扁平多边形,镶嵌排列呈铺路状,细胞接触紧密。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:兔食管上皮细胞增殖速度快,细胞形态小,细胞传代消化时间为2-3min,传代密度为3X个,培养4d细胞融合度可达80%或以上。细胞图片
细胞潜在用途利用CR技术进行体外分离培养的兔食管上皮细胞并建立细胞系,可作为研究食管生物学特性、食管相关疾病的发病机制提供研究模型。
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