看点:lncRNA定位于亚细胞结构的功能论证
关键词:
Paraspckl:“旁斑”,细胞核内的特殊结构,0.2-1μm。许多细节和功能现今还不明确。1表示细胞质,2表示细胞核,3表示核仁,4表示“旁斑”
EM:电镜检测。
SRM:高精度显微镜检测。
MG:激动剂,可以在Nat1存在情况下促进Paraspckl的形成和壮大。
Nat1_1:Nat1短的转录本。
Nat1_2:Nat1长的转录本。
结论:Nat1_2中部的结构域元件与NONO互作,有效地参与了“旁斑”结构的形成。
结果展示如下:
有规则的的“旁斑”需要Nat1_2中部的结构域元件进行组装
A:裁切Nat1以及Nat2的示意图:
实线:克隆序列
虚线:Nat1_2存在但未克隆的序列
橙色:电镜检测使用的探针序列
绿色:高精度显微检测使用的探针
B:构建过表达A中所显示的lncRNA区段,使用RNA-FISH的方法检测“旁斑”的亚细胞定位情况发现情况发现:Nat1_2中间段对“旁斑”Paraspckls形成比较重要。
C:对B图的图像分析的定量结果也显示:Nat1_2中间段缺失后的对细胞形态显著差异。
Ara:探针示踪的面积
Sumintnsity:探针示综的面积的密度灰度值总和
D:电镜观察的结果和荧光显微镜几乎一致,但是“旁斑”Paraspckls的形态差异明显。
E:对B图的图像分析的定量结果也显示:Nat1_2中间段缺失后的对细胞形态显著差异。
SurfacAra:斑点面积
Diamtr:斑点直径
Lngth:斑点深度
F:RNA-FISH实验观察亚细胞结构“旁斑”Paraspckls中,NEAT1_2和明星蛋白NONO互作情况。发现:NONO结合的是NEAT1_2中部区段。
DRB:RNApol2抑制剂,阻止新生的lncRNA合成。
NONO:Non-POUdomain-containingoctamr-bindingprotin,重要的转录因子,和许多生命过程有关。
材料来源:MolcularCll
FunctionalDomainsofNEAT1ArchitcturallncRNAInducParaspcklAssmblythroughPhasSparationFig3.ThMiddlDomainofNEAT1_2IsRquirdforOrdrdParaspcklAssmbly
原文链接为该文
原文机理图示:
NEAT1posssssamodulardomainstructurwithdistinctfunctionstobuildparaspcklsNEAT1.
ThNEAT1_2middldomainisncssaryandsufficintforparaspcklassmbly.
NEAT1_2middlsubdomainsrcruitNONOdimrsthatinitiatparaspcklassmbly.
NEAT1_2subdomainscaninducaggrgationofNONOdimrsinvitro.
lncRNANEAT1具有模块化构建paraspckls的独特功能。
lncRNANEAT1_2中部结构域是paraspckl装配是必要的也是充分的。
lncRNANEAT1_2中部结构域可以招募NONO,启动paraspckl组装过程。
lncRNANEAT1_2一些结构域可以在体外诱导NONO的聚集反应。
Paraspckls旁斑的结构示意图:
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