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lncRNANEAT1关键片段促使细

发布时间:2019-3-7 0:21:16   点击数:

看点:lncRNA定位于亚细胞结构的功能论证

关键词:

Paraspckl:“旁斑”,细胞核内的特殊结构,0.2-1μm。许多细节和功能现今还不明确。1表示细胞质,2表示细胞核,3表示核仁,4表示“旁斑”

EM:电镜检测。

SRM:高精度显微镜检测。

MG:激动剂,可以在Nat1存在情况下促进Paraspckl的形成和壮大。

Nat1_1:Nat1短的转录本。

Nat1_2:Nat1长的转录本。

结论:Nat1_2中部的结构域元件与NONO互作,有效地参与了“旁斑”结构的形成。

结果展示如下:

有规则的的“旁斑”需要Nat1_2中部的结构域元件进行组装

A:裁切Nat1以及Nat2的示意图:

实线:克隆序列

虚线:Nat1_2存在但未克隆的序列

橙色:电镜检测使用的探针序列

绿色:高精度显微检测使用的探针

B:构建过表达A中所显示的lncRNA区段,使用RNA-FISH的方法检测“旁斑”的亚细胞定位情况发现情况发现:Nat1_2中间段对“旁斑”Paraspckls形成比较重要。

C:对B图的图像分析的定量结果也显示:Nat1_2中间段缺失后的对细胞形态显著差异。

Ara:探针示踪的面积

Sumintnsity:探针示综的面积的密度灰度值总和

D:电镜观察的结果和荧光显微镜几乎一致,但是“旁斑”Paraspckls的形态差异明显。

E:对B图的图像分析的定量结果也显示:Nat1_2中间段缺失后的对细胞形态显著差异。

SurfacAra:斑点面积

Diamtr:斑点直径

Lngth:斑点深度

F:RNA-FISH实验观察亚细胞结构“旁斑”Paraspckls中,NEAT1_2和明星蛋白NONO互作情况。发现:NONO结合的是NEAT1_2中部区段。

DRB:RNApol2抑制剂,阻止新生的lncRNA合成。

NONO:Non-POUdomain-containingoctamr-bindingprotin,重要的转录因子,和许多生命过程有关。

材料来源:MolcularCll

FunctionalDomainsofNEAT1ArchitcturallncRNAInducParaspcklAssmblythroughPhasSparation

Fig3.ThMiddlDomainofNEAT1_2IsRquirdforOrdrdParaspcklAssmbly

原文链接为该文

原文机理图示:

NEAT1posssssamodulardomainstructurwithdistinctfunctionstobuildparaspcklsNEAT1.

ThNEAT1_2middldomainisncssaryandsufficintforparaspcklassmbly.

NEAT1_2middlsubdomainsrcruitNONOdimrsthatinitiatparaspcklassmbly.

NEAT1_2subdomainscaninducaggrgationofNONOdimrsinvitro.

lncRNANEAT1具有模块化构建paraspckls的独特功能。

lncRNANEAT1_2中部结构域是paraspckl装配是必要的也是充分的。

lncRNANEAT1_2中部结构域可以招募NONO,启动paraspckl组装过程。

lncRNANEAT1_2一些结构域可以在体外诱导NONO的聚集反应。

Paraspckls旁斑的结构示意图:

T细胞

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