Hoechst染色液(1mg/ml)
产品货号:H
产品规格:1ml/5ml
产品简介:
Hoechst,也称bisBenzimideH或HOE,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。Hoechst的最大激发波长为nm,最大发射波长为nm;Hoechst和双链DNA结合后,最大激发波长为nm,最大发射波长为nm。本Hoechst染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
产品组成:
操作步骤(仅供参考):
使用前用生理盐水或PBS将Hoechst染色液稀释倍,即为工作液。
1.对于固定的细胞或组织:
a.对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst染色。
b.对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst工作液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品3倍体积的工作液,混匀。室温放置3-5分钟。
c.吸除Hoechst染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2.对于活细胞或组织:
a.加入适当量Hoechst工作液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1mL工作液,对于96孔板一个孔需加入μL工作液。
b.在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
注意事项:
1.荧光染料都存在淬灭的问题,为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。建议染色后尽量当天完成检测,活细胞或组织染色后应立即观察。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:-20℃避光保存,一年有效。