Autophagy：吸烟引起呼吸道上皮细胞自噬的关键调控基因：OSGIN1
RoleofOSGIN1inMediatingSmoking-inducedAutophagyintheHumanAirwayEpithelium
时间IF8.
期刊Autophagy
发现目标香烟有毒我们都知道，但香烟有毒的生物机理，我们却尚未清楚明白。本文为我们揭示介导吸烟者呼吸道上皮细胞自噬的关键基因：OSGIN1，并未类似的研究提供可借鉴的研究模式。
OSGIN1是线粒体相关促凋亡TP53基因的靶基因，在生物体中介导氧化应激反应和细胞死亡，且其功能的发挥通常与细胞自噬同时发生。吸烟会导致呼吸道上皮细胞出现氧化应激反应和细胞自噬，因此我们假设吸烟诱导的OSGIN1表达上调可以在人类呼吸道上皮细胞中诱导自噬。
实验怎么做
找基因表达差异：微阵列分析全基因组相关性分析：RNA-Seq技术上调基因表达找变化略显高大上的亚细胞共定位观察主要结果首先研究者采用微阵列芯片技术（microassay）评估了吸烟对体内呼吸道上皮细胞中OSGIN1表达的影响，结果发现在吸烟者的呼吸道上皮细胞中OSGIN1（氧化应激诱导的生长抑制因子1）显著上调，并且TaqManPCR和RNA-Seq也证实了这一发现（图1）。
来自17名健康个体的原代呼吸道基底细胞/祖细胞的RNAseq数据对OSGIN1进行体外全基因组相关性分析，结果显示OSGIN1与许多典型的自噬相关基因显示出强烈的正相关，（图2A）。香烟提取物（CSE）可以导致OSGIN1和自噬相关基因的表达（图2B）。研究者利用慢病毒增强了人类原代呼吸道基底细胞中OSGIN1的表达，观察其对自噬的影响。TaqManPCR分析显示，OSGIN1的表达增强显著上调了自噬标志物MAP1LC3B和SQSTM1的表达。
OSGIN1诱导自噬体和自噬溶酶体形成。用慢病毒感染或慢病毒感染人原代呼吸道基底细胞。使用免疫荧光染色和免疫组织化学染色，通过MAP1LC3B的点状染色来评估自噬体和自体溶酶体的形成。通过MAP1LC3B+细胞的百分比来量化lenti-OSGIN1在不同剂量，不同时间和不同受试者中的作用。
为了进一步表征OSGIN1处理对细胞自噬的形态学影响，通过MAP1LC3B与SQSTM1或CD63（核内体标志物）和LAMP1（溶酶体标志物）的共定位证实OSGIN1诱导自噬体，自噬内涵体和自体溶酶体形成。
这些观察结果表明OSGIN1上调介导了吸烟导致的人类呼吸道上皮细胞自噬，对临床改善吸烟者健康具有重要的指导意义。
参考文献：[1]WangG,ZhouH,Strulovici-BarelY,Al-HijjiM,OuX,SalitJ,WaltersMS,StaudtMR,KanerRJ,CrystalRG.RoleofOSGIN1inmediatingsmoking-inducedautophagyinthehumanairwayepithelium.Autophagy.;13:-20.doi:10./...
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