近日，中科院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室研究员林强团队与华中农业大学水产学院教授高泽霞等合作，基于单细胞测序与基因编辑技术，率先揭示了鱼类肌间刺形成的关键细胞群与核心基因runx2b，并系统阐明了调控鱼类骨骼（肌间刺）形成的分子机制。相关研究近日发表于《国家科学评论》。
鱼类作为低等的脊椎动物，在漫长的进化历程中伴有复杂的性状产生与演化，其中，鱼类骨骼演化是其形态多样性产生的主要原因。在“低等”真骨鱼类中存在一类特有骨骼——肌间刺，它们分布在椎体两侧肌隔中，起到支撑肌肉的作用，因鱼类物种不同而呈现多种发生与发育形式，但当前，调控鱼类肌间刺形成的关键基因及其调控机制仍然不清楚。
在该研究中，研究人员为明确鱼类肌间刺形成的关键细胞群，首先利用单细胞转录组测序技术明确了野生型斑马鱼肌肉组织（含肌间刺）的细胞分型特征，筛选到了与肌间刺形成相关的肌腱祖细胞、肌腱分化细胞、成熟肌腱细胞和成骨细胞等类群。单细胞拟时序分析结果表明肌间刺是由肌腱祖细胞分化为肌腱分化细胞，再分化为成骨细胞而形成的。
根据基因在肌腱细胞分化为成骨细胞或成熟肌腱细胞轨迹上的表达模式，研究人员筛选了肌间刺形成的关键基因，并运用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建斑马鱼突变体品系，最终发现runx2b基因是影响鱼类肌间刺发生的关键基因。同时，单细胞测序分析发现斑马鱼runx2b基因突变体的肌肉组织（不含肌间刺）中成骨细胞类群数目显著减少，在个体和细胞水平明确了鱼类肌间刺形成的分子调控作用。
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