细胞传代是指将一代细胞分离并移植到新的培养皿中，以维持细胞的生长和扩增。其主要步骤如下：1.准备培养皿：将新的培养皿（如离心管、96孔板等）准备好，并在其中加入适当的培养基。2.预备细胞：将细胞培养至80%-90%的密度，收获细胞，使用细胞培养基洗涤1-2次，以去除细胞碎片和废弃物。3.溶解细胞黏附：加入适当的消化酶（如胰酶、牛血清蛋白酶等）或胰蛋白酶-EDTA混合溶液，在37℃下消化细胞黏附，恰当的摇晃可加速细胞分离。4.停止消化：加入含有10%胎牛血清的培养基，停止消化作用，均匀地将上清液吹入离心管中。5.离心：离心细胞悬液，以去除上清液和细胞碎片。6.制备细胞悬液：加入适量的培养基，在细胞悬液中悬浮细胞。7.移植到新培养皿中：将制备好的细胞悬液移植到新的培养皿中，平均分配。8.培养：将培养皿置于恰当的环境中，控制温度、湿度、CO2浓度等因素，定期更换培养基，观察细胞生长情况。需要注意的是，严格按照操作规程进行，避免任何可能的误操作和污染。
细胞传代的详细步骤最清晰版本
发布时间:2024/8/2 17:24:29 点击数： 次
