细胞名称:人原代宫颈上皮细胞
细胞来源:源于中国女性宫颈组织
组织特点:样本组织块呈肉粉色,质地软,易剪碎,基本不含血细胞
分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)
培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)
组织分离步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼取材→无水乙醇洗一次(≤3s)→SolutionB洗两次→剪碎→加入10mLSolutionC,37℃,2h→离心,rpm,8min→去上清,5mLSolutionD重悬,37℃,10min→加入10mLSolutionE重悬过滤→离心,rpm,8min→去上清,加入5mLSolutionB,重悬→离心,rpm,5min→去上清,人原代宫颈上皮细胞基础培养基重悬,铺至T25培养瓶。(详尽步骤可参考IMMORTECH-IMT-K3原代细胞分离培养试剂盒说明书)。▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲组织分离要点
组织块软,剪碎操作上难度较小,其剪碎程度直接影响最终获取细胞量的多少,故尽可能剪碎至糊状;该宫颈组织消化时间为2h,期间晃动数次避免堆聚以保证组织与SolutionC接触充分;SolutionD消化时可晃动离心管悬起组织碎片以保证消化效果;组织消化终止后出现一定程度的粘稠,注意减少转移损失,必要时更换细胞筛。
细胞形态:细胞多呈扁平多边形,镶嵌排列呈铺路状,细胞结合紧密,细胞间质少,生长分裂旺盛。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:该细胞增殖速度快且稳定,细胞传代消化时间为3min,传代密度为2X个/cm2,培养3d后细胞融合度可达80%或以上。细胞图片
原代宫颈上皮细胞P14d原代宫颈上皮细胞P33d细胞潜在用途
(1)利用CR技术在体外建立起人源的宫颈上皮细胞系,作为相关宫颈特性或病变研究的生物体外实验模型,有助于研究该细胞的生物学特性和遗传调控机制。
(2)可实施细胞水平的药物敏感实验,为药物研究和应用的提供参考。
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