细胞名称:猪原代前列腺上皮细胞
细胞来源:西藏仔猪剪取的前列腺组织
组织特点:细胞形态略呈卵形鳞片状,传代消化较难脱落,消化时间约3-5min
分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)
培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTECH)
组织分离培养步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼(1)将F细胞重悬于1-2mL猪前列腺上皮细胞基础培养基形成单细胞悬液。
(2)转移到T25中,将培养基体积补至4-5mL,使F细胞均匀铺在培养瓶中,置于培养箱(37℃,5%CO2)贴壁5小时以上或过夜,确保F细胞贴壁量达70%T25细胞培养瓶以上。
(3)24h后观察,若有漂浮细胞,需换新鲜猪前列腺上皮细胞基础培养基。
(4)将新分离的猪前列腺上皮细胞重悬于1-2mL猪前列腺上皮细胞基础培养基中,转移至已接种F细胞的培养瓶,培养基体积补至7mL,置于培养箱(37℃,5%CO2)培养。
(5)猪前列腺细胞生长丰度达70-80%可进行传代,先洗脱F细胞。
(6)加入胰酶置于37℃孵育2-7min(视细胞贴壁能力而定)。当90%猪前列腺上皮细胞从培养瓶脱落后,加入1mL终止液(含10%血清的PBS缓冲液,使用前37℃水浴复温)终止。离心转移到T25中,将培养基体积补至4-5mL,加入适量F细胞均匀铺在培养瓶中,置于培养箱(37℃,5%CO2)贴壁5小时以上或过夜,确保F细胞贴壁量达70%T25细胞培养瓶以上。
(7)24h后观察,若有漂浮细胞,更换新鲜猪前列腺上皮细胞基础培养基。
(详尽原代细胞分离步骤请参考IMT-K3原代细胞分离试剂盒说明书,以上详细培养步骤及注意事项请参考IMT-K1-猪原代前列腺上皮细胞培养试剂盒)
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猪原代前列腺上皮细胞P21
传代后贴壁状态P22
细胞潜在用途
(1)利用CR技术在体外建立起猪源的前列腺上皮细胞系,作为相关前列腺特性或病变研究的生物模型。
(2)可实施细胞水平的药物敏感实验,为药物研究和应用的提供参考。
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