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慢病毒包装的简要操作说明

发布时间:2017-10-1 13:01:23   点击数:

小白讲实验,带你走进科研殿堂,助你从实验小白变身科研达人

实验小白一、慢病毒(LV)载体系统组分

1.Lentiviraltransferplasmidencodingyourinsertofinterest:简称Transfer质粒,就是携带你目的基因的质粒,也是通常我们需要做载体改造的质粒,通常长这样:

选中的部分就是LVtransfer质粒的主体,通常是位于两个LTR之间;

注:lentiCRISPRV2可以兼容第二代、三代包装系统。

2.Packagingplasmid(s):LV病毒包装的结构蛋白编码质粒,通常都会表达Gag,Pol,Rev跟Tat等基因。

3.Envelopeplasmid:LV蛋白质外壳编码的质粒,比如常用有VSV-G;

通常LV包装系统分为1、2、3代,现在常用的是2代和3代。一般情况是代数越靠后越安全,但目前最流行的是第二代系统。

Firstgeneration:LVpackagingsystemen







































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