细胞名称:人原代角膜上皮细胞
细胞来源:源于人正常角膜缘组织
组织特点:角膜缘取样为角膜与巩膜移行区,样本组织为红润长条形,质地较软,易剪碎
分离试剂盒:IMT-K3(IMMORTECH)
培养试剂盒:IMT-K1-(IMMORTEHCH)
组织分离步骤▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼▼取材置于SolutionA中→无水乙醇洗一次(≤3s)→SolutionB洗两次→剪碎→加入10mLSolutionC,37℃,1.5h→离心,rpm,8min→去上清,5mLSolutionD重悬,37℃,10min→加入10mLSolutionE重悬过滤→离心,rpm,10min→去上清,加入5mLSolutionB,重悬→离心,rpm,5min→去上清,IMT-CM-人原代角膜上皮细胞培养基重悬,铺至6孔板中培养。(详尽步骤请参考IMMORTECH-IMT-K3原代细胞分离培养试剂盒说明书)。▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲▲组织分离要点
该组织取样量较小(为1.5mm小条),质地较柔软,剪碎操作过程中,尽可能少带点液体,更易于剪碎,其剪碎程度直接影响最终获取细胞量的多少,故尽可能剪碎;该角膜组织消化时间为1.5h,期间晃动数次避免堆聚以保证组织与SolutionC接触充分。
细胞形态:细胞多呈扁平多边形,镶嵌排列呈铺路状,细胞结合紧密。细胞特性:原代培养,持续传代。细胞培养要点:该细胞增殖速度一般,细胞传代消化时间为4-5min,从分离至培养8d后细数量能达到胞5X个细胞图片
P14d
Pd
细胞潜在用途
(1)人原代角膜上皮细胞可用于角膜病的研究,许多角膜病的基础科学研究首先需要在体外建立细胞培养的模型,角膜细胞的体外培养是现代角膜病基础学研究的重要方法之一,它对研究角膜的生理学,病理学、免疫学以及分子生物学都具有十分重要意义。
(2)体外角膜细胞培养模型可以在临床前研究中对新型眼科药物的药动学行为进行初步研究。
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