沉默Annexin-A1对小胶质细胞BV-2生长和迁移能力的影响及其机制
本文作者魏礼清刘璐丁钟欢肖潇施静卢忠心
罗振钊
医院检验科；华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系
摘要探讨沉默Annexin-A1(Anxa1)基因对小胶质细胞系BV-2细胞生长、迁移能力的影响及其可能机制。
采用RT-PCR和Westernblot法从基因和蛋白水平验证小干扰RNA(siRNA)对小胶质细胞系BV-2细胞内Anxa1的沉默效率,采用MTT法检测Anxa1siRNA对BV-2细胞增殖的作用,膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶(AnnexinⅤ/PI)双染流式细胞术检测Anxa1siRNA对BV-2细胞凋亡的影响,应用Transwell小室检测Anxa1siRNA对BV-2细胞迁移能力的影响,Westernblot法检测细胞周期和迁移相关信号通路蛋白的表达。
Anxa1siRNA干扰组在24h、48h、72h细胞生长抑制率分别为(16.9±2.1)%、(23.1±3.6)%和(42.4±1.7)%,与siRNA-NC组[分别为(1.35±0.5)%、(2.06±0.7)%和(8.65±0.9)%]比较,差异有统计学意义(P0.05),沉默Anxa1对BV-2细胞的增殖发挥抑制作用;转染后48hAnxa1siRNA组细胞凋亡率为(18.4±2.1)%,明显高于siRNA-NC组(5.2±0.3)%和空白对照组(4.3±0.2)%;Anxa1siRNA干扰组细胞迁移能力(28.7±5.2)明显低于siRNA-NC组(.4±11.4,P0.01),Anxa1siRNA干扰可显著下调细胞周期蛋白CyclinD1的表达水平和激活p38与JNK信号通路。
siRNA沉默Anxa1基因可抑制小胶质细胞的生长、迁移能力,分别通过下调CyclinD1和激活p38与JNK信号通路来实现。
RNA干扰;Annexin-A1;BV-2细胞;细胞生长;迁移能力
